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            奧瑞達生物給您講解ELISA試驗檢測的質(zhì)量分析

            發(fā)布時(shí)間: 2024-04-09  點(diǎn)擊次數: 316次

            ELISA方法現在已經(jīng)被廣泛的應用于各種抗原和抗體測定。拋開(kāi)試劑盒本身質(zhì)量外,我們在實(shí)驗中也有很多因素都會(huì )影響試驗的正常結果。其中最常出現的問(wèn)題是顯色淡,靈敏度偏低、重復性不佳、假陽(yáng)性結果和假陰性結果,不管出現什么樣的結果都會(huì )直接影響我們的實(shí)驗結果。下面來(lái)分析ELISA實(shí)驗非正常檢測結果產(chǎn)生的常見(jiàn)原因,并分析其解決辦法,以提高檢測質(zhì)量。

            1、方法學(xué)的影響

            ELISA 測定模式包括以下幾種: 雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM 抗體捕捉法、競爭抑制法, 其中競爭抑制法因受操作時(shí)差所引起的競爭等因素的影響, 結果重復性較差, 質(zhì)量較難控制。

            2、試劑因素

            試劑的選擇 檢測的原理均基于抗原抗體反應。由于該反應過(guò)程受多種因素的影響, 如普遍存在基質(zhì)效應、交叉反應等, 因而檢測結果難以溯源, 不同方法、不同試劑之間甚至同一試劑不同批號間結果均缺乏可比性。試劑質(zhì)量在很大程度上決定了檢測的水平, 因此在引入新項目之前必須對試劑進(jìn)行嚴格的評估。試劑的評估有以下幾個(gè)步驟: (1) 確定開(kāi)展該項目的必要性; (2) 了解該項目現有的檢測方法和原理; (3) 在了解試劑的組成基礎上選擇多家試劑盒進(jìn)行比較,判斷標準參考方法或參考物質(zhì), 其次為臨床的滿(mǎn)意度及機構的報告如各級室間質(zhì)量評價(jià)、CDC 報告等; (4) 定期對檢測結果進(jìn)行追蹤反饋直至最終認可該試劑。

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